微生物實習心得體會

          時間:2023-11-15 14:14:00 實習心得 我要投稿

          微生物實習心得體會優選6篇

            我們得到了一些心得體會以后,可以將其記錄在心得體會中,這么做能夠提升我們的書面表達能力。那么你知道心得體會如何寫嗎?以下是小編為大家收集的微生物實習心得體會,供大家參考借鑒,希望可以幫助到有需要的朋友。

          微生物實習心得體會優選6篇

          微生物實習心得體會1

            大三下學期5月份,我們動物檢疫專業的同學開始了為期2個多月的教學實習,在眾多輔導老師之中,我有幸跟隨我校動物科技學院預防系的趙宇軍教授進行學習。實習的地點就在我校動科樓的微生物實驗室,以前我們曾在這里上過實驗課,所以并不陌生。這次大家來到實驗室為自行選擇課題進行相關實驗操作,我對世界聞名的金黃色葡萄球菌非常感興趣,在老師的帶領下進行了相關食物中該菌的檢驗。下面我們來回顧這次實驗。

            一、實驗內容:食品中金黃葡萄球菌的檢測方法

            實驗內容

            金黃色葡萄球菌是一種引起人類和動物化膿感染的重要致病菌,也是造成人類食物中毒的常見致病菌之一。本菌廣泛分布于自然界,如空氣、土壤、水及其它環境中。在人類和動物的皮膚及外界相通的腔道中,也經常有本菌存在。據報導,在正常人群中的帶菌率可達30%~80%,其中皮膚帶菌率為8~22%,鼻腔和咽喉部等上呼吸道的帶菌率在40~50%以上,因此其可通過各種途徑和方式,尤其是經工作人員的手和上呼吸道而污染食品。由于致病金黃葡萄球菌能產生腸毒素,故一旦細菌污染食品,并在合適的溫度環境下,細菌可以大量繁殖并產生腸毒素,從而引起消費者食物中毒。由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒,在世界各國都極為普遍。特別是在北美及歐洲等地區發病率更高。在上述這些國家中,每年有金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例,僅次于沙門氏菌,而在細菌性食物中毒病例排到第2~3位,有此而造成的經濟損失也相當慘重,在我國由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例也時有報導,所以.

            目前世界各國都把金黃色葡萄球菌列為食品衛生的法定檢測項目。我國對金黃色葡萄球菌目前采用的方法是以國家標準GB.4789-10-84及檢驗檢疫系統行業標準SN.0172-92作為依據。

            整個檢測過程獲得最終結果須時5天左右,既費時又費力,并造成貨物積壓,也影響貨物的及時出運,并使貨主的倉儲成本提高,造成較大的經濟損失。多年來很多食品微生物實驗室都在探索和尋找一些準確性高,并快速的`檢測方法,最近我們分別從美國3M公司和法國生物梅里埃公司獲得兩種快速檢測致病性金黃色葡萄球菌的培養基,其名稱為:①PetrifilmRS

            A.CountPlate(由美國3M公司研制生產),是一種薄膜型快速檢測金黃色葡萄球菌的計數平板。②Baird-parker+RPFAgar.(由法國生物梅里埃公司研制生產的用Baird-Parker瓊脂加免血漿纖維蛋白原的金黃色葡萄球菌檢測計數平板)。

            二、實驗原理:實驗原理:原理Petrifilm.RS

            A.測試薄膜是由二部分組成。第一部分是由黃金色葡萄球菌培養基片,此培養基中含有經修正的Barid-Parker,營養成分加上以冷水可溶解的膠質。第二部分是一種耐熱核酸酶(TNase)反應片,含有DNA及甲苯胺蘭(ToluidineBlue-O)及四唑指示劑(Tetraeolium)。此指示劑有助于菌落的計數及確定葡萄球菌耐熱核酸酶的存在。耐熱去氧核糖核酸(deoxyribonulcasDnase)為產毒金葡菌之典型特征,此酶非常耐熱,在100℃加熱30min,不易喪失活性,在130℃之下,其D值為16.6min,此酶之分子量為16800,等電點PH為9.6,耐熱去氧核糖酸與檢測血漿凝固酶相似,是一種鑒定金黃色葡萄球菌的方法,在Petrifilm.RSA檢測片上,耐熱DNA酶反應看起來,呈粉紅色環帶包圍著一個紅色或蘭色的菌落。Petrifilm.RSA檢測片,必須與Peyrifilm耐熱核酸酶反應片一起使用,單獨使用

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            A.測試薄膜是由二部分組成。第一部分是由黃金色葡萄球菌培養基片,此培養基中含有經修正的Barid-Parker,營養成分加上以冷水可溶解的膠質。第二部分是一種耐熱核酸酶(TNase)反應片,含有DNA及甲苯胺蘭(ToluidineBlue-O)及四唑指示劑(Tetraeolium)。此指示劑有助于菌落的計數及確定葡萄球菌耐熱核酸酶的存在。耐熱去氧核糖核酸(deoxyribonulcasDnase)為產毒金葡菌之典型特征,此酶非常耐熱,在100℃加熱30min,不易喪失活性,在130℃之下,其D值為16.6min,此酶之分子量為16800,等電點PH為9.6,耐熱去氧核糖酸與檢測血漿凝固酶相似,是一種鑒定金黃色葡萄球菌的方法,在Petrifilm.RSA檢測片上,耐熱DNA酶反應看起來,呈粉紅色環帶包圍著一個紅色或蘭色的菌落。Petrifilm.RSA檢測片,必須與Peyrifilm耐熱核酸酶反應片一起使用,單獨使用將不會顯示菌落,因為具有輔助計數菌落的指示劑是在反應片上,而不是在Petrifilm.RSA檢測片上。Baird-parker+RPFagar,這一培養基中含有豐富的營養成分,其中以氯化鋰代替亞碲酸鉀,使菌落顏色呈黑色,RPF補充有兔血漿和牛纖維蛋白原,以便檢測凝固酶活力,胰酶可以抑制全部或部分圍繞凝固酶陽性菌落周圍沉淀暈環纖維蛋白的溶解,因此凡存在血漿凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌,將在培養基中呈現有暈環的黑色菌落,即可確認,并作計數。

          微生物實習心得體會2

            在新疆農業大學農學院羅明教授為指導老師,開始我的畢業實習。具體實習是從6月開始,其主要內容為復播、套作棉田土壤質量微生物學研究。至今實驗部分已經結束,基本按照實習計劃完成任務,其任務是研究比較棉花單作、棉花套種、棉花復播模式下不同生育期不同土壤微生物活性。

            新疆是全國最大的優質棉生產基地,其棉花占全國產量的1/3,棉花產業對新疆農民收入的提高、經濟發展、社會進步具有重要地位,經過幾十年的發展,化肥資源已經逐步成為新疆棉花高產、優質、高效、可持續發展的重要物質基礎。最近兩年新疆中長絨棉發展很快,棉花色澤特征在全國棉主產區最好,品級較高。

            棉花色澤好,品級較高,主要原因是新疆有著得天獨厚的自然資源優勢。

            新疆棉區地處亞歐大陸腹地,熱量條件較好,宜棉區最熱月平均氣溫為250C以上;棉花生長期內太陽輻射充足,總日照時數2600h左右;降雨量少,光熱水資源十分豐富。

            近年來新疆棉區多次刷新全國棉花單產紀錄,單產和總產不斷提高,1993年總產居全國各省(區)之首,1995年國家對新疆棉花生產布局作出重大調整。“”期間,把棉花生產重點向新疆棉區傾斜,20xx年棉花種植面積達100萬hm2,總產150萬t。“十五”期間,新疆棉花種植面積由20xx年的101萬hm2發展到20xx年的111.3萬hm2,占全國棉花面積的19.6%;總產由20xx年的150萬t到發展20xx年的175萬t,占全國總產量的27.7%;單產由20xx年的1485kg/hm2提高到20xx年的1572.3kg/hrn2,為全國平均單產的1.4倍,種植面積、單產、總產均穩定增長。兵團棉花面積20xx-20xx年穩定在46萬hm2,總產87萬t左右,占全疆的49.7%.20xx年單產達1890kg/hm2,創歷史新高。新疆棉區多次刷新全國棉花單產紀錄,單產和總產不斷提高的高產途徑主要包括:加速培育抗病、優質棉種;合理肥料投入,實現高、中、低產棉田均衡增產;大力推廣節水農業;機械化采棉;改變作物的布局與輪作倒茬;節本增效,簡化栽培技術體系。

            綜合來看,20xx年全疆大部棉區春季熱量條件及棉花生長的基本熱量條件差于常年和20xx年,影響了棉花的生長發育速度;棉花整個生長期的氣象條件,北疆棉區弊大于利;南疆部分棉區的熱量條件亦略顯不足。因此20xx年我區棉花單產為1543kg/hm2比上一年減產了3%,但是由于播種面積比上年增加了93.08x103,所以總產達到了160x104,比上一年增加7%。20xx年全疆大部棉區棉花生長的熱量條件好于常年但略差于上一年,對棉花生長較有利,但階段性高溫、干旱、洪水、冰雹、霜凍等氣象災害對棉花生產有一定的影響。因此,全疆棉花整個生長期的氣象條件利大于弊,有利于棉花產量的提高。20xx年我區棉花單產為1554kg/hm2,比上一年降低了2.2%,播種面積為1127.55hm2,總產為175.25x104t皮棉,比上一年增產16.8%。20xx年的光、熱、水條件非常好,是植棉難得的好年成。冰雹、洪水、大風、干旱、霜凍及階段性高溫等氣象災害雖對棉花生產有一定影響,但全疆棉花生長期間的氣象條件明顯好于常年,20xx年棉花單、總產再創新高,單產為1690kg/hm2,總產達到了195.7104t,比20xx年分別增產8.8%和11.7%。大部分棉區布局單一,實行連作,不僅對生態環境的影響不利,其棉田投入量也在逐年增加。對農業可持續發展極為不利。

            總之,雖然棉花總產在逐年遞增,并成為新疆農業生產收入的主要來源,但也存在不少問題。隨著近幾年棉田種植面積的不斷擴大,再擴大耕地面積就比較困難。因此,要提高棉產,就要從提高單產看起。進一步來說,就是要從加速培育抗病、優質棉種;合理肥料投入,實現高、中、低產棉田均衡增產;大力推廣節水農業;機械化采棉;改變作物的布局與輪作倒茬;節本增效,簡化栽培技術體系等方面著手。

            這次實習,就是針對改變棉區布局單一來進行的,在新疆進行復播、套作棉田的研究,主要是針對土壤肥力這一方面進行土壤微生物的研究。

            此次實習,思想上得到了不少收獲。在研究初期,廣范圍了解到目前新疆農業的主要狀況,重點是對新疆棉花產業發展的認識。通過了解,雖然對新疆目前在棉產業上取得的成就感到自豪,但同時也對其生產、加工等存在的一系列問題而擔憂。深知,做為新疆人,作為新疆農業大學農學院的學子,優秀的思想品質,良好的專業素養及深厚的專業技術是多么重要。更重要的是怎樣將自己所學到的專業知識用運在新疆農業的發展上。為此,要從一言一行,點點滴滴做起。首先要有正確的思想認識,在實習中,在以后的工作中都要有科研的態度。在實際工作中要有不怕苦不怕累的堅韌毅力。更重要的是,每一個工作環節都要有一定準備和明確的目標,要盡力注重每一個細微環節,要嚴謹認真,來不得半點馬虎。細節決定成敗,這也是我從這次實習中,在指導老師的教導下,深刻認識并樹立起來的思想。

            與此同時,還用到了多種學科知識,主要是微生物學知識,包括理論和實驗技能部分,如各類微生物的形態鑒別、生理特征和生活習性和基本的滅菌、接種操作技能。穿插生態學思想,包括微生物的生態多樣性、生物與其生存環境的關系等等。還用到農作學的知識,主要是種植模式這一部分的'內容。以及學過的農學知識,主要是棉花各生育時期的特點等等。總之,通過這次實習,達到了理論與實踐的結合,使我所學過的各學科知識融會貫通,增強了知識體系的鞏固。

            與此同時,不僅在思想上有了深刻認識,在知識理論體系上有了進一步的提高,在業務技能的學習和掌握上也是碩果累累。從最基本的微生物實驗室各種滅菌操作、儀器洗滌到微生物的實驗室培養、觀察、分析、規律的總結以及微生物的生理生態特性的研究方法(包括土壤基礎呼吸、纖維素分解強度、微生物生物量的測定、各類微生物生理群的數量測定),都是在羅老師的細心指導下掌握并學會了應用。其中,也學會了不少儀器的使用,包括高壓滅菌鍋、超凈工作臺、培養箱、干燥箱、水平搖床、熱水恒溫箱、真空泵等一系列儀器的使用。記得這次實習第一次在超凈工作臺上的一系列心理變化,沒上超凈臺前,腦海一片霧水,因為作實驗前沒有查閱過相關資料,為此,羅老師親自在超凈臺前,一步一步耐心示范,邊做邊向我們講述注意事項。一邊看老師操作一邊銘記于心。當自己實際操作時,就有點手忙腳亂,捉襟見肘了。又是三角瓶,又是試管,又是培養皿的,還必須高度集中注意力,以免張冠李戴。就那樣,折騰了三四個小時才把那次固體培養基接種工作完成。做的過程中,不斷告訴自己,休息一會吧。但另一個聲音又不斷告訴自己,必須做完才能休息,否則會影響培養結果的,心中一直這樣反反復復直到做完為止。完成之后,當時就頭暈腦漲,渾身發酸,嘗到了什么是辛酸,同時也得到了收獲——熟練得掌握了固體培養基培養微生物的技能。

            盡管在許多具體實驗操作中出現錯誤,但從老師的指導、仔細查閱相關資料、自己不斷得思考琢磨,不斷改正錯誤,總結經驗,最終從數次失敗中走了出來,成功完成了這次實習的實驗部分。

            因此,這次實習,不僅讓我了解了新疆農業的現狀,得了不少思想收獲,鞏固了我的知識體系,更重要的是增強了實踐動手操作能力,培養了我的科學素養,使我在今后的學習工作中獲得了不少寶貴的經驗。

          微生物實習心得體會3

            病原微生物感染引起發病,院內感染不斷增加。細菌由于人類不斷婪用抗菌藥物,耐藥性不斷增加,這些都嚴重危害人類健康。病原微生物在實驗室潛在對實驗室人員的威脅也日趨嚴峻。生物安全的宣教必不可少,怎樣把只有基本微生物知識的學生,與臨床實驗室大量面對病人標本的采集、運送、接種、培養、觀察、鑒定、藥敏、報告等各個環節的實踐結合起來,由基礎知識向專業技能有效轉化,把基礎理論知識在實習中有效發揮,與實踐相結合使之升華,是培養合格檢驗人才的關鍵。現就微生物室的實習帶教體會總結如下。

            1、重視標本送檢前的質量控制。

            微生物實驗室每天都收到來自病房,門診病人送檢的大量標本,有痰、中段尿、傷口分泌物、生殖道拭子、血培養、膿液、術中臨時所采集的標本等等。標本的采集、運輸和處理是否得當及時對試驗結論有直接影響。是分析前質量控制的重要環節,只有讓學生全面認識標本采集與處理的全過程及影響因素,才能確保檢驗結論的準確性、有效性。

            1.1標本的采集

            例如中段尿的采集,應告知學生尿道內是人體無菌的腔道,尿道外則是有菌的部位。所以采集中段尿時必須對外陰進行徹底消毒,排出前一段尿液,以便沖洗外尿道或外陰,留取中段尿于無菌杯中送檢。如痰標本的采集,應囑病人于清晨嗽洗口腔,咳出深部的痰液于無菌杯中送檢,如是支原體和衣原體的檢測,則應留取女性宮頸拭子或男性尿道拭子,因為支原體和衣原體都只寄生在宮頸或者尿道的柱狀上皮細胞內。

            1.2標本的處理

            學生應知道,標本的及時處理接種對微生物的成活率至關重要,例如淋病奈瑟氏菌,需要保溫,保濕送檢,提倡床邊接種,培養基應先預溫,接種后放36℃溫箱、5%co2環境,保濕培養。又如痰標本應接種在血平板,巧克力平板,沙基,嗜血流感巧克力平板上,血平板和巧克力平板主要觀察病人痰標本里的基礎菌群的生長狀態。沙基主要觀察是否有念珠菌生長,嗜血流感巧克力平板主要是觀察是否有嗜血流感桿菌屬的生長,此平板在配制時加入了針對性抗菌藥物,能夠抑制革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽性球菌的生長,只適合于嗜血桿菌屬的生長。學生應學會每一份標本,接種到相應有用、有目的、有選擇的培養基中。

            2、注重特征、綜合分析

            細菌的鑒定是運用所學知識,綜合性判斷的過程。它需要根據病人基本信息,標本來源、診斷、平板上形態特征,生長情況,氧化酶、觸酶陰陽性狀、革蘭氏染色鏡下形態,生化反應,藥敏結果等進行綜合性判斷,最終得出鑒定結果。我們在帶教過程中應根據以上信息,逐項分析,深入淺出,理論聯系實際,把學生在課堂中所學知識調動出來,溫故知新,對病人標本的狀況加以充分闡述,循序漸進,循循誘導。加深學生在視覺、聽覺、嗅覺的印象。例如革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽性球菌在血平板,巧克力平板是有區別的。革蘭氏陰性桿菌在平板上菌落直徑較大,約3—5mm,突起、圓形,濕潤、有光澤感,我把它比作面包。革蘭氏陽性球菌,在平板以上菌落直徑較小,約2—3mm,較前者小、圓形、濕潤。有光澤感,但不如前者,貼平板生長,我把它比作餅。一包一餅就簡單易記地把革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽性球菌區分開來。使細菌菌落生活化,形象化,易于記憶。如銅綠假單胞在平板上菌落邊緣不整齊,有綠色素,菌落邊緣向外延長,培養時間越長菌落越大,有特殊的.芳香氣味。學生通過芳香氣味等以上特征,進一步識認了銅綠假單胞菌。在常見的病人標本中,所檢出的細菌菌落都具固有的特征和性狀,就像人與人之間通過性格,特征就能區分開來。我們也應該把各種細菌在平板上的菌落特征加以描述,學生就較易接受學懂。

            3、培養學生自學能力和動手能力。

            專科和本科的學生在微生物室的實習時間大約有八至九周。在第一周,會安排學習培養基的制備,在此期間學習微生物室常用培養基的制備,如巧克力平板、SS平板、麥康凱平板、藥敏平板、營養瓊脂平板、淋基平板、肉湯管、雙糖管、TCBS平板、4號瓊脂平板等的制備過程。帶教老師將邊帶邊放手讓學生自己做一些基本的操作,如消毒平板、配制培養基,天平稱量,復溶瓊脂加血,倒平板等基本功的操作。第二周學習梅毒初篩,確證試驗和血清學的一些試驗,也將學習衣原體、支原體的檢測方法。第三到九周將學習細菌的鑒定。用一至兩周時間學習各類標本的接種,平板的選擇,平板分區劃線,熟練掌握接種的流程。第五周開始學習各類細菌的生化鑒定和藥敏試驗。帶教老師應結合平板上菌落形態。鏡下革蘭氏染色結果,各類平板上生長情況,病人的基本資料,診斷,本標來源等基本信息分析評述給學生聽,逐步推論出細菌的大致方向,正確引導學生的思路。學生在每天應對比較常見而且較有意義的細菌進行鑒定,做生化反應及藥敏試驗,通過四周自己動手操作,能對臨床上常見的細菌有一定的認識,能把菌鑒定到種。通過實踐提高學生的動手能力,熟練掌握細菌室的基本操作技能。深化理論知識,使到理論與實踐融會貫通。提倡學生多提問,有疑問老師及時解答與學生的學習相動。

          微生物實習心得體會4

            在這次實習中,我和其他三位同學被一起分到了微生物科。在微生物科負責我們實習工作的是一位韓老師,他為人很隨和,給我們布置的實習任務就是每個人跟蹤一種類型的臨床標本。他要求跟蹤從標本被送到微生物科開始一直到得出最終的報告為止并把從中的所見所得記錄下來,通過這樣一個過程讓我們能夠對微生物科有盡可能多的了解。除此之外,韓老師還讓我們了解一下里面的一些大型自動化儀器的用途及操作方法,為我們以后能更快的適應實習做準備。實習的第一天,我們看的是標本的接種,我們看過那里的老師熟練的接種過程后深感自己平時做實驗室的速度是如此之慢,如果以我們這種速度去完成每天要接種上百個標本的臨床工作是根本不可能的。此外我們還看了臨床上的革蘭染色,發現它與我們做實驗時有一些不同,主要區別是在染料上,臨床上為了提高染色速度都用了快速染料。總之,這一天的實習讓我們了解到的就是效率在臨床上是十分重要的。

            實習的第二、第三天,我們看的是臨床標本的.鑒定,對某些細菌,臨床上有經驗的老師只要通過觀察菌落特征、氣味及其他一些簡單物理性狀就可以初步判斷出是何種細菌,讓我們大感吃驚。科室里還有一位很熱心的老師在她空閑的時候向我們詳細的講解了一番在臨床上一些常見微生物的鑒定方法,聽過之后讓我們受益匪淺。實習的第四天,我們看的是臨床標本的藥敏反應。在這一天里,我們詳細的了解了臨床上是如何做藥敏反應的,以及不同的微生物需要做哪些藥敏反應,這些都是我們在課堂上所無法學到的寶貴知識。最后一天,我們看的是微生物科是如何做質控的。通過這一天的實習,使我們深刻了解到質控對于檢驗科的重要性。

            之前,我們只是從書本上了解到其對于檢驗這一學科是很重要的,但是無法有深切的體會,這次實習給了我們一次很好的機會能讓我們在實踐中認識到它。除了這些以外,我們每天還在科室里老師有空的時候讓他們給我們講解了一番微生物科中各種孵育箱的作用、ATB儀器的操作方法及其他一些儀器的用途和操作方法,讓我們對微生物科有了更全面的了解。五天的時間眨眼就過去了,我的實習也在不知不覺中圓滿結束了,能學到的東西卻比我們在學校一個月學到的還多。回想這段時間的生活,我覺得自己過的很充實,也很快樂,更重要的是我學到了不少東西。我相信,這段時間的收獲將是我人生中的一筆寶貴的財富。我也相信,通過這次實習的鍛煉,將幫助我能更快的融入到即將到來的實習生活中以及以后的工作中。

          微生物實習心得體會5

            微生物與免疫學是中藥學專業基礎課,屬限選課程。微生物學與免疫學的基本任務是使學生掌握微生物學與免疫學的基本概念、基本技術及其初步應用。重點任務是使學生明確病原微生物的生物學特性、致病與免疫機制、檢驗診斷要點及特異性防治原則,通過本課程的學習,培養學生實驗操作能力,良好的學習習慣與嚴謹的科學思維方式,為進一步學習生物制藥工藝學、分子生物學、藥理學等學科打下良好基礎。同時也為開發研制與微生物有關的藥物,保證和控制藥品質量提供良好技術人才,從而更有效地防治疾病,保障人民身體健康。

            微生物學與免疫學是即是基礎學科又是應用學科。因此課堂教學要求理論密切聯系實際,要貫徹少而精的'原則、注重啟發式教學、發揮學生的主動性和創造性。要充分利用圖表、幻燈、投影儀、錄像等教學設備,以提高教學效果。還應注意介紹國內外研究微生物學與免疫學的最新成果和新進展,不斷地賦予它新的教學內容。

            主要研究與醫學有關的病原微生物的生物學特性、致病和免疫機制、特異性診斷以及防治措施,以控制和消滅感染性疾病及與之相關的免疫損傷等疾病,達到保障和提高人類健康水平的目的。免疫學是研究宿主免疫系統識別并消除有害生物及其成分的應答過程及機制的科學。以分子、細胞、器官及整體調節為基礎發展起來的現代免疫學是生命科學中的前沿學科之一,他推動著醫學和生命科學的全面發展。

          微生物實習心得體會6

            病原微生物檢驗實習總結大三下學期5月份,我們動物檢疫專業的同學開始了為期2個多月的教學實習,在眾多輔導老師之中,我有幸跟隨我校動物科技學院預防系的趙宇軍教授進行學習。實習的地點就在我校動科樓的微生物實驗室,以前我們曾在這里上過實驗課,所以并不陌生。這次大家來到實驗室為自行選擇課題進行相關實驗操作,我對世界聞名的金黃色葡萄球菌非常感興趣,在老師的帶領下進行了相關食物中該菌的檢驗。下面我們來回顧這次實驗。

            一、實驗內容

            食品中金黃葡萄球菌的檢測方法實驗內容金黃色葡萄球菌是一種引起人類和動物化膿感染的重要致病菌,也是造成人類食物中毒的常見致病菌之一。本菌廣泛分布于自然界,如空氣、土壤、水及其它環境中。在人類和動物的皮膚及外界相通的腔道中,也經常有本菌存在。據報導,在正常人群中的帶菌率可達30%~80%,其中皮膚帶菌率為8~22%,鼻腔和咽喉部等上呼吸道的帶菌率在40~50%以上,因此其可通過各種途徑和方式,尤其是經工作人員的手和上呼吸道而污染食品。由于致病金黃葡萄球菌能產生腸毒素,故一旦細菌污染食品,并在合適的溫度環境下,細菌可以大量繁殖并產生腸毒素,從而引起消費者食物中毒。由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒,在世界各國都極為普遍。特別是在北美及歐洲等地區發病率更高。在上述這些國家中,每年有金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例,僅次于沙門氏菌,而在細菌性食物中毒病例排到第2~3位,有此而造成的經濟損失也相當慘重,在我國由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例也時有報導,所以目前世界各國都把金黃色葡萄球菌列為食品衛生的法定檢測項目。我國對金黃色葡萄球菌目前采用的方法是以國家標準GB.4789—10—84及檢驗檢疫系統行業標準SN.0172—92作為依據。

            整個檢測過程獲得最終結果須時5天左右,既費時又費力,并造成貨物積壓,也影響貨物的及時出運,并使貨主的倉儲成本提高,造成較大的經濟損失。多年來很多食品微生物實驗室都在探索和尋找一些準確性高,并快速的檢測方法,最近我們分別從美國3M公司和法國生物梅里埃公司獲得兩種快速檢測致病性金黃色葡萄球菌的培養基,其名稱為:

            ①PetrifilmRS CountPlate(由美國3M公司研制生產),是一種薄膜型快速檢測金黃色葡萄球菌的計數平板。

            ②Baird—parker+RPFAgar。(由法國生物梅里埃公司研制生產的用Baird—Parker瓊脂加免血漿纖維蛋白原的金黃色葡萄球菌檢測計數平板)。

            二、實驗原理

            測試薄膜是由二部分組成。第一部分是由黃金色葡萄球菌培養基片,此培養基中含有經修正的'Barid—Parker,營養成分加上以冷水可溶解的膠質。第二部分是一種耐熱核酸酶(TNase)反應片,含有DNA及甲苯胺蘭(ToluidineBlue—O)及四唑指示劑(Tetraeolium)。此指示劑有助于菌落的計數及確定葡萄球菌耐熱核酸酶的存在。耐熱去氧核糖核酸(deoxyribonulcasDnase)為產毒金葡菌之典型特征,此酶非常耐熱,在100℃加熱30min,不易喪失活性,在130℃之下,其D值為16。6min,此酶之分子量為16800,等電點PH為9.6,耐熱去氧核糖酸與檢測血漿凝固酶相似,是一種鑒定金黃色葡萄球菌的方法,在檢測片上,耐熱DNA酶反應看起來,呈粉紅色環帶包圍著一個紅色或蘭色的菌落。檢測片,必須與Peyrifilm耐熱核酸酶反應片一起使用,單獨使用將不會顯示菌落,因為具有輔助計數菌落的指示劑是在反應片上,而不是在檢測片上。Baird—parker+RPFagar,這一培養基中含有豐富的營養成分,其中以氯化鋰代替亞碲酸鉀,使菌落顏色呈黑色,RPF補充有兔血漿和牛纖維蛋白原,以便檢測凝固酶活力,胰酶可以抑制全部或部分圍繞凝固酶陽性菌落周圍沉淀暈環纖維蛋白的溶解,因此凡存在血漿凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌,將在培養基中呈現有暈環的黑色菌落,即可確認,并作計數。

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