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淺談廣東標準與中國藥典陳皮炮制品中橙皮苷含量的比較
【摘要】 目的 以橙皮苷為指標比較廣東標準陳皮炮制品與藥典標準炮制的陳皮的質量差異。方法 高效液相色譜法，色譜條件：Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)為色譜柱，流動相為甲醇?水(體積比40∶60)，流速為1.0 mL/min，柱溫為25 ℃，檢測波長為284.1 nm，進樣量為10 μL。結果 廣東標準陳皮炮制品中的橙皮苷含量平均值為4.276%，藥典標準炮制陳皮的橙皮苷含量平均值為4.257%，兩種方法差異無顯著性意義。結論 廣東標準陳皮炮制品的質量與藥典標準炮制品水平持平。
【關鍵詞】 陳皮;橙皮苷;廣東標準;國家標準;高效液相色譜法
Abstract:Objective To compare the quality of Citrus reticulata Blanco processed according to Guangdong standard and Chinese Pharmacopeia based on the content of hesperidin.Method Hesperidin in Citrus reticulata Blanco processed from the two standards was analyzed on a Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)column using methanol?water(40∶60) as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min and detection wavelength 284 nm. Result The average content of hesperidin in Citrus reticulata Blanco processed by Guangdong standard was 4.276%, and that by Chinese Pharmacopeia was 4.257%, while no significant difference was noted in respect of the content between the two processings. Conclusion Similar qualities of Citrus reticulata Blanco are obtained from the two processings.
Key words:Citrus reticulata Blanco; hesperidin; HPLC
陳皮為蕓香科植物橘(Citrus reticulata Blanco)及其栽培變種的干燥成熟果皮，味苦、辛，性溫，可理氣健脾、燥濕化痰，用于胸脘脹滿、食少吐瀉、咳嗽痰多[1]。主產于廣東、福建、四川、江蘇、浙江、江西、湖南等地[2]。橙皮苷是陳皮中含量較高的一種雙氫黃酮氧苷物質，早期作為維生素P，具有增強毛細血管壁作用，現代研究表明其具有降低血壓、抗過敏、降低低密度膽固醇、影響血壓、改變體內酶活性、改善微循環、抗菌、抗肝炎、抗氧化、抗腫瘤、抗癌等生理功能，具有很高的藥用價值[3]。
陳皮有多種炮制方法，不同的藥品標準收載的方法也不相同，《中國藥典》2005版規定陳皮的炮制方法為除去雜質，噴淋水，潤透，切絲，陰干[1]。《廣東省中藥炮制規范》1984版中陳皮炮制方法與藥典方法不同，主要用蒸制。為了比較廣東地方標準和國家標準陳皮的質量差異，探討飲片質量標準，本文采用高效液相色譜法對10個樣品的陳皮中橙皮苷進行含量測定，為廣東地區飲片生產的規范化和陳皮炮制工藝的合理性提供理論依據。
1儀器與試藥
Waters高效液相色譜儀(四元泵，二極管陣列檢測器，自動進樣)，DK?S26型電熱恒溫水浴鍋(上海精宏實驗設備有限公司)，RE?52?98旋轉蒸發器(上海亞榮生化儀器廠)，SHZ?D(Ⅲ)循環水式真空泵(鞏義市英峪予華儀器廠)。
橙皮苷對照品(批號721-9202，中國藥品生物制品檢定所)，石油醚(60～90℃)為分析純，甲醇有化學純和色譜純，水為二級水。10個陳皮藥材樣品的購入地見表2。
2方法與結果 1色譜條件
色譜柱：Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm);流動相：甲醇?水(體積比40∶60);流速：1.0 mL/min;柱溫：25 ℃;檢測波長：284.1 nm;進樣量：10 μL。色譜圖見圖1。 2對照品溶液的制備
精密稱取橙皮苷對照品0.00373 g，以甲醇溶解并定容至5 mL，搖勻，過微孔濾膜，即得對照品溶液(0.746 mg/mL)。 3供試品溶液的制備
將各陳皮樣品粉碎，置50 ℃烘干30 min，取出置干燥器內備用。
精密稱取各樣品1 g，加甲醇100 mL，回流提取2次，每次2 h，濾過，合并濾液，減壓濃縮，甲醇定容至100 mL，搖勻，過微孔濾膜，即得供試品溶液。 4檢測波長的確定
紫外掃描樣品溶液顯示其最大吸收在284.1 nm處，因此以此波長為檢測波長進行含量測定。 5線性關系考察
按“2.1”項下色譜條件，分別吸取對照品溶液2、4、5、6、8、10 μL進樣測定，記錄峰面積。以峰面積(A)為縱坐標，進樣量(m)為橫坐標繪制標準曲線并計算得回歸方程為A=2 267 200m-396 288，r=0.999 7，線性范圍是1.492～7.460 μg。
圖1HPLC色譜圖 略 6穩定性試驗
在同樣的色譜條件下，將同一供試品溶液在0、2、4、8、12、24 h各進樣1次測定，測得峰面積的RSD=1.99%，說明樣品溶液在24 h內穩定。 7精密度試驗
將同一供試品溶液按“2.1”項下條件重復進樣6次，分別測定峰面積，結果得RSD=2.02%。 8重復性試驗
精密稱取同種樣品5份，按“2.3”項下方法制備，并按“2.1”項下色譜條件平行測定5次，計算含量，結果得RSD=3.05%。
2.9加樣回收試驗
采用加樣回收法，精密稱取已知橙皮苷含量的樣品5適量，分別精密加入一定量的橙皮苷對照品，按“2.3”項方法制備，并按“2.1”項色譜條件進行測定，平行做5份，結果見表1。
表1橙皮苷回收率試驗結果 略 10樣品含量測定
將10份供試品溶液分別按“2.1”項下的色譜條件進樣，記錄色譜峰面積，根據標準曲線計算橙皮苷在藥材中的含量，結果見表2。將廣東本省炮制的藥材與藥典法炮制的藥材進行橙皮苷含量的比較，結果見表3，從表3結果可看出，兩種方法結果比較差異無顯著性(P0.05)。
表210種陳皮樣品中橙皮苷的含量 略
表3兩種炮制方法橙皮苷含量的比較 略
3討 論 1本實驗考察了藥典提取方法，即用石油醚索氏提取3 h脫脂后再用甲醇提取，高效液相譜圖顯示在橙皮苷的峰附近沒有雜峰干擾;再改用甲醇直接提取，高效液相的譜圖變化不大，橙皮苷的峰附近也沒有雜峰干擾，并且該峰面積增加。因此最后確定用甲醇直接提取。 2根據文獻[3-5]記載，流動相大多數采用甲醇?水洗脫系統。在實驗中，首先用甲醇?水(體積比45∶55)洗脫，橙皮苷約10 min出峰，但與前一個峰分離不好;更換為甲醇?水(體積比35∶65)洗脫，峰的分離很好，但是橙皮苷在約45 min出峰，時間太長，影響實驗進度;調整為甲醇?水(體積比40∶60)，峰分離度好，出峰時間約20 min，時間合適，故流動相確定為甲醇?水(體積比40∶60)。 3HPLC法測定中，按《中國藥典》2005版標準生產的陳皮中橙皮苷的含量以秦皇島唐人醫藥店的樣品含量最高，秦皇島艾欣超市的樣品最低。廣東的5個樣品雖然按地方標準炮制規范生產，但與其他樣品在含量上并未有較大區別;而在5個樣品之間卻有差異，最高為5.500%，最低為3.473%，由此反映出飲片內在質量的不同。《中國藥典》2005版對陳皮中橙皮苷的含量做出不得少于3.5%的規定，本次10個樣品中，除了2個樣品橙皮苷的含量略低之外，其他樣品都符合要求。
4結 論
廣東標準陳皮炮制品與國家標準陳皮炮制品的橙皮苷含量沒有統計學差異，故就整體而言，廣東標準陳皮炮制品的質量符合國家標準。
【參考文獻】
[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:一部[S].北京：化學工業出版社,2005:136.
[2] 張志海，王彩云，楊天鳴，等.陳皮的化學成分及藥理作用研究進展[J].西北藥學雜志,2005,20(1):47-48.
[3] 李紅，趙征，汪滿情.橙皮苷提取工藝條件的研究[J].食品研究與開發,2003,24(2):29-31.
[4] 張莉.高效液相色譜法測定三蛇膽陳皮末中橙皮苷的含量[J].廣東藥學院學報，2002，18(4)：275-276.
[5] 運委，張建蘋.高效液相色譜法測定蛇膽陳皮散中橙皮苷的含量[J].時珍國醫國藥，2006(5)：60-61.
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