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人肝癌細胞系HepG2中survivin-3鑒定及其真核載體構(gòu)建
畢業(yè)論文
全部作者: | 徐兵 楊來華 |
第1作者單位: | 江蘇省丹陽市中醫(yī)院 |
論文摘要: | 目的:鑒定肝癌細胞系HepG2中survivin異構(gòu)體(survivin varient,SVV varient)并構(gòu)建其真核表達載體。方法:提取HepG2細胞總RNA,根據(jù)Gen-Bank內(nèi)survivin 3個異構(gòu)體核苷酸序列設計3條引物對其進行鑒定;設計含有BamHⅠ和XhoⅠ雙酶切位點的SVV-3引物,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)擴增SVV-3完整編碼區(qū),擴增產(chǎn)物用BamHI 和XhoI 雙酶切后定向克隆到真核細胞表達載體pcDNA3.1 中, 序列測定進行鑒定。結(jié)果:HepG2細胞表達SVV-3、1,SVV-3表達尤為豐富。對SVV-3克隆測序,與Gen-Bank報道完全1致。結(jié)論:成功鑒定出HepG2表達SVV-3、1,構(gòu)建了SVV-3真核表達載體,為后續(xù)研究提供更明確的目標。 |
關(guān)鍵詞: | SVV,真核表達載體,HepG2 遠程下載 論文(免費PDF論文全文) |
發(fā)表日期: | 2007年11月06日 |
同行評議: | 文章題目簡明,準確反映了研究工作的特定內(nèi)容。摘要4要素明確,重點科學問題與目的、材料和方法和結(jié)論相符。采用分子生物學常規(guī)方法(逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應),研究了人肝癌細胞系HepG2中survivin-3 鑒定及其真核載體構(gòu)建。但也存在如下問題:1. HepG2 總RNA 提取及反轉(zhuǎn)錄合成HepG2 總cDNA應給出具體引物2.PCR產(chǎn)物長度上存在疑問3.參考文獻相對陳舊,使得討論部分未能和最新研究成果對比,所以討論部分不夠深刻。建議修改后發(fā)表 |
綜合評價: | |
修改稿: | |
注:同行評議是由特聘的同行專家給出的評審意見,綜合評價是綜合專家對論文各要素的評議得出的數(shù)值,以1至5顆星顯示。 |
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